17c呱呱爆料

　　RT-笔颁搁试剂盒的组成核酸提取试剂核酸扩增或逆转录-核酸扩增试剂产物检测试剂(有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成，故无专门的产物检测试剂)影响笔颁搁试剂盒质量的因素内在因素：原材料、核酸提取方法、方法学设计影响笔颁搁试剂盒质量的因素：扩增所需的原材料寡核苷酸引物和探针缓冲液和dNTP聚合酶、逆转录酶等PCR反应混合物。
 

　　RT-笔颁搁试剂盒除了考虑它的敏感性、特异性、稳定性、操作简便程度外，还应包括：试剂盒提供的试剂覆盖整个笔颁搁检测试验的程度。如果试剂盒提供了整个笔颁搁检测试验的试剂，表明该试剂盒对笔颁搁检测试验的试剂具有了全程控制性能。相反，笔颁搁检测的试剂的质量控制程度比较低，意味着检测质量可控程度低。
 

　　例如：溴化乙锭仅仅起荧光染料的作用，如果在阳光下长时间的照射下失效了，在紫外灯下发荧光效能降低，可能会造成一些弱阳性样品的漏检，出现假阴性。其它试剂出现问题也是一样影响检测质量。试剂盒在生产过程中，有一套试剂生产质量控制体系。每一试剂组分都经过灵敏度、敏感性、特异性质量控制的检测，在有效期内能确保每种试剂的质量。因此，选择试剂盒进行笔颁搁检测是比较理想的控制方法。在笔颁搁检测中，建议全部使用试剂盒提供试剂，对笔颁搁检测质量控制有益。
 

　　实验耗材也是影响笔颁搁检测质量的因素之一。笔颁搁反应管薄厚以及传导热量性能等直接影响笔颁搁检测效果。在热盖笔颁搁仪上一般不需要加入矿物油，但有些笔颁搁反应管盖子不严密，导致扩增过程中反应液水份蒸发，严重影响检测灵敏度。